Technischer Support

Sandwich-Kit
Sandwich-Kits sind vollständig validiert und Ready-to-Use, enthält 96- auch Streifen Platten vorbeschichtet mit Capture Antikörper zum Beispiel Antigen erkennen.
Die Platte ist mit einem Capture-Antikörper beschichtet., dann Antigen-haltige Probe ist auf die Platte aufgetragen und alle vorliegenden Antigen bindet Antikörper zu erfassen; Während ein Waschschritt wird die Platte gewaschen, um ungebundenes Antigen entfernen; dann erkennen Antikörper wird hinzugefügt und bindet an antigen; Dann Enzym-linked Sekundärantikörper wird hinzugefügt und auf das erkennen Antikörper bindet; Substrat wird hinzugefügt und wird durch Enzym zu nachweisbaren Form umgewandelt. Die Extinktion der Platte Brunnen wird gemessen, um das Vorhandensein und die Menge des Antigens bestimmen. Die Farbe entwickelt sich im Verhältnis zur Menge der Menge des Antigens.

 

 

Wettbewerbsfähige Kit
Wettbewerbsfähige Kit In einem wettbewerbsfähigen ELISA-assay, die Probe-Antigen konkurriert mit einem Referenz-Antigen für die Bindung an eine bestimmte Menge an beschriftete Antikörper. Die Platten sind vorbeschichtete mit Erkennung von Antikörpern. Der Probe und Biotinylierte Antikörper werden hinzugefügt, um den Brunnen. Während ein Waschschritt wird die Platte gewaschen, um ungebundenes Antigen entfernen. Substrat wird hinzugefügt und wird durch Enzym zu nachweisbaren Form umgewandelt. Die Extinktion der Platte Brunnen wird gemessen, um das Vorhandensein und die Menge des Antigens bestimmen. Die Farbe entwickelt sich umgekehrt proportional zur Menge der Menge des Antigens. Das bedeutet das mehr Antigen in der Probe, die weniger Referenz-Antigen erkannt wird und je schwächer das Signal.
Einige wettbewerbsfähige ELISA Kits verwenden beschriftete Antigen anstatt eine beschriftete Antikörper. Das beschriftete Antigen und das Probe-antigen (unbeschriftete) konkurrieren Sie um die Bindung an den primären Antikörper. Je geringer die Menge des Antigens in der Probe, Je stärker das Signal gekennzeichnet mehr Antigen im Brunnen. Es eignet sich für kleine Antigene erkennen.

 

 

Qualitative Kit
Qualitative Kit Qualitative Ergebnisse liefern ein einfaches positives oder negatives Ergebnis für eine Probe. In quantitativen ELISA, die optische Dichte (OD) der Probe wird mit einer Standardkurve verglichen., Was ist in der Regel eine serielle Verdünnung einer Lösung bekannter Konzentration des Zielmoleküls.

Sandwich ELISA Kit Testverfahren
Bereiten Sie alle Reagenzien, Standardlösungen und Proben wie angewiesen. Alle Reagenzien vor Gebrauch auf Raumtemperatur zu bringen. Der Test wird bei Raumtemperatur durchgeführt..
Bereiten Sie doppelter standard Punkte durch seriell Verdünnung der standard-Stammlösung vor.

Bestimmen Sie die Anzahl der Streifen für den Assay erforderliche. Legen Sie die Streifen in den Rahmen für den Einsatz. Die ungenutzten Streifen sollte bei 2 bis 8 ° C gelagert werden.
Geben Sie 50μlstandard in standard

.

Fügen Sie 40μl Probe zu Probe Brunnen hinzu und fügen Sie dann 10μl Anti-TNF-alpha-Antikörper zum Beispiel Brunnen, Fügen Sie 50μl Streptavidin-HRP Probe Brunnen und standard Brunnen (Nicht gut Blindkontrolle ). Gut mischen. Die Abdeckplatte mit einer Versiegelung. Inkubieren 60 Minuten bei 37° C.

Entfernen Sie die Versiegelung zu und waschen Sie die Platte 5 Mal mit Waschpuffer. Brunnen mit mindestens genießen 0.35 ml Waschpuffer für 30 Sekunden, um 1 Minute für jede Wäsche. Für automatisierte waschen, aspirieren Sie alle Brunnen und waschen 5 Mal mit Waschpuffer, Überfüllungen Brunnen mit waschen Tupfen Sie die Platte auf Küchenpapier oder anderen saugfähigen material.

Fügen Sie 50μl Substratesolution A in jede Vertiefung hinzu und fügen Sie dann 50μl Substratlösung B in jede Vertiefung. Inkubieren Sie Teller bedeckt mit einer neuen Versiegelung für 10 Minuten bei 37° C im Dunkeln.

Fügen Sie 50μl Stopplösung in jede Vertiefung, die blaue Farbe wird sofort in gelb geändert..

Die optische Dichte zu bestimmen (OD-Wert) von jeder gut sofort mit einer Mikrotestplatte Reader soll 450 nmwithin 30 min nach Zugabe der Stopplösung.