Unterstützung

ELISA-Kits sind vollständig validiert und Ready-to-Use, mit 96-Well-Streifen Platten vorbeschichtet mit Capture Antikörper zum Beispiel Antigen erkennen.

Sandwich-Kit-Prinzip

In einem wettbewerbsfähigen ELISA-assay, Probe-Antigen und beschriftete Antigen konkurrieren für Capture Antikörperbindung. Weitere Zielprotein es ist in der Probe, die weniger beschriftete Antigen erfasst werden und je schwächer das Signal.

Wettbewerbsfähige Kit-Prinzip

 

Sandwich ELISA Kit Testverfahren

Bereiten Sie alle Reagenzien, Standardlösungen und Proben wie angewiesen. Alle Reagenzien vor Gebrauch auf Raumtemperatur zu bringen. Der Test wird bei Raumtemperatur durchgeführt..

Bereiten Sie doppelter standard Punkte durch seriell Verdünnung der standard-Stammlösung vor.

Bestimmen Sie die Anzahl der Streifen für den Assay erforderliche. Legen Sie die Streifen in den Rahmen für den Einsatz. Die ungenutzten Streifen sollte bei 2 bis 8 ° C gelagert werden.

Geben Sie 50μlstandard in standard

.

 

Fügen Sie 40μl Probe zu Probe Brunnen hinzu und fügen Sie dann 10μl Anti-TNF-alpha-Antikörper zum Beispiel Brunnen, Fügen Sie 50μl Streptavidin-HRP Probe Brunnen und standard Brunnen (Nicht gut Blindkontrolle ). Gut mischen. Die Abdeckplatte mit einer Versiegelung. Inkubieren 60 Minuten bei 37° C.

 

Entfernen Sie die Versiegelung zu und waschen Sie die Platte 5 Mal mit Waschpuffer. Brunnen mit mindestens genießen 0.35 ml Waschpuffer für 30 Sekunden, um 1 Minute für jede Wäsche. Für automatisierte waschen, aspirieren Sie alle Brunnen und waschen 5 Mal mit Waschpuffer, Überfüllungen Brunnen mit waschen Tupfen Sie die Platte auf Küchenpapier oder anderen saugfähigen material.

 

Fügen Sie 50μl Substratesolution A in jede Vertiefung hinzu und fügen Sie dann 50μl Substratlösung B in jede Vertiefung. Inkubieren Sie Teller bedeckt mit einer neuen Versiegelung für 10 Minuten bei 37° C im Dunkeln.

 

Fügen Sie 50μl Stopplösung in jede Vertiefung, die blaue Farbe wird sofort in gelb geändert..

 

Die optische Dichte zu bestimmen (OD-Wert) von jeder gut sofort mit einer Mikrotestplatte Reader soll 450 nmwithin 30 min nach Zugabe der Stopplösung.