Prise en charge

Kits ELISA sont entièrement validés et prêt à l’emploi, contenant des plaques de 96 puits bande préalablement recouverts d’anticorps de capture pour détecter les antigènes de l’échantillon.

Principe du Kit "sandwich"

Lors d’un test ELISA compétitif, antigène de l’échantillon et antigène marqué rivalisent pour la liaison d’anticorps de capture. La protéine cible plus il est dans l’échantillon, l’antigène moins marqué est capturé et le plus faible du signal.

Principe de Kit concurrentiel

 

Sandwich ELISA Kit MODE OPERATOIRE

Préparer tous les réactifs, solutions étalons et les échantillons en suivant les instructions. Apportez tous les réactifs à température ambiante avant utilisation. L’analyse est réalisée à température ambiante.

Préparer les points standard en double par dilution en série de la solution d’étalon.

Déterminer le nombre de bandes nécessaires pour le dosage. Insérez les bandes dans les cadres d’utilisation. Les bandes inutilisées doivent être conservés à 2-8° C.

Ajouter 50μlstandard à puits standard

.

 

Ajouter 40μl un échantillon à puits et puis ajoutez des anticorps alpha de 10μl anti-TNF au puits d’échantillon, puis ajoutez 50μl streptavidine-HRP au puits d’échantillons et des puits de standards (Contrôle à blanc pas bien ). Bien mélanger. Couvrir la plaque avec un scellant. Incuber 60 minutes à 37° C.

 

Enlever l’enduit et laver la plaque 5 fois avec le tampon de lavage. Faire tremper les puits au moins 0.35 tampon de lavage ml pour 30 secondes pour 1 minutes pour chaque lavage. Pour le lavage automatique, aspirer tous les puits et laver 5 fois avec le tampon de lavage, puits de trop remplir avec lavage Blot la plaque sur un essuie-tout ou autre matériau absorbant.

 

Ajouter 50μl substratesolution A dans chaque puits et puis ajoutez la solution de substrat 50μl B dans chaque puits. Incuber plaque recouvert d’un scellant nouveau 10 minutes à 37° C dans l’obscurité.

 

Ajouter la Solution d’arrêt 50μl dans chaque puits, la couleur bleue change immédiatement en jaune.

 

Déterminer la densité optique (Valeur de do) valeur de chaque bien immédiatement en utilisant un lecteur de microplaques 450 nmwithin 30 min après l’ajout de la solution d’arrêt.