サポート

ELISA キットは完全に検証し、使用する準備ができて, キャプチャのサンプルの抗原を検出する抗体でプレコート 96 ウェル ストリップ プレートを含む.

サンドイッチ キット原理

競争力のある ELISA アッセイに, サンプルの抗原と標識抗原捕獲抗体の結合の競合します。. より多くのターゲット蛋白質のサンプルは, 小さい標識抗原を取り込まれると弱い信号.

競争のキットの原理

 

サンドイッチ ELISA キットの試金プロシージャ

すべての試薬を準備します。, 標準溶液とサンプルどおり. すべての試薬を使用する前に室温にもたらす. 室温で分析を実行します。.

連続標準原液を希釈して重複の標準的なポイントを準備します。.

ストリップのアッセイに必要な数を決定します。. 用フレームでストリップを挿入します。. 未使用のストリップは 2-8 ° C で保存する必要があります。.

標準的な井戸に 50μlstandard を追加します。

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40μl サンプルに井戸を追加し、サンプルの井戸に 10 μ l 抗 TNF α 抗体を追加, サンプル井戸および標準的な井戸には 50 μ l ストレプトアビジン-HRP を追加します。 (よくない空白のコントロール ). よく混ぜる. シーラー プレートをカバーします。. インキュベート 60 37 ° C で分.

 

シーラーを削除し、洗浄します。 5 洗浄バッファーで回. 少なくともと井戸を浸す 0.35 ml 洗浄バッファー 30 秒 1 各洗浄のための分. 自動洗浄の, すべての井戸を吸引し、洗浄 5 洗浄バッファーで回, 洗うとにたいして井戸しみプレート紙タオルまたは他の吸収材を.

 

各ウェルには 50 μ l substratesolution A を追加し、各ウェルに 50 μ l 基板ソリューション B を追加. ための新しいシーラーで覆われたプレートを孵化させなさい 10 暗闇の中で 37 ° C で分.

 

各ウェルに 50 μ l を停止ソリューションを追加します。, すぐに青の色が黄色に変わります.

 

光の密度を決定します。 (OD 値) まあすぐにマイクロ プレート リーダーを使用してそれぞれの設定します。 450 nmwithin 30 分後停止ソリューションを追加します。.